| 送交者: 大号蚂蚁[☆★★我佛慈悲★★☆] 于 2018-11-28 16:43 已读 233 次 2 赞 | 大号蚂蚁的个人频道 |
CRISPR-CAS在进化中不是为基因编辑而生的，而是一个敌我识别的免疫系统，它的切割不是那么精确，只要不误伤细菌自己的DNA就算完成任务了。用于基因编辑的难度，就像用青龙偃月刀做手术。 6park.com
所以，在实用中，CRISPR-CAS有几个问题，第一是它对靶点的结合不精确，它的识别序列不长，检测也不像真正的人类复制转录翻译酶系那么精确，可能会跑到本来不想要它结合的序列上面去。中国科学家编辑人类胚胎的尝试就发现了很多非特异性切割，造成了一大堆乱七八糟的突变。 6park.com
第二是识别序列以后的切割操作并不精确。因为CRISPR-CAS不是哺乳动物酶系，跟人类DNA修复系统缺乏配合，所以操作以后留下的序列是非常随机的，根本无法预测会切割在哪里。根据我们实验室的测序结果来看，CRISPR-CAS处理后靶序列的缺失位置变化非常大，从21bp的巨大缺失，到根本无变化的都有，实际编辑位点左右偏移可以达到20bp，有的造成frame shift，有的只缺失1个或几个氨基酸，有的是一个或数个点突变，有的根本没变化。而因为人类基因有两个拷贝，这两个等位基因不是同时被切割的，有可能只切割一个，另一个还是原样，也有可能两个都切割了，但位点和产生的序列还各自不同。 6park.com
第三是对切割位点进行精确编辑非常困难。前面已经说了CRISPR-CAS的切割位点十分混乱，而且编辑是依靠引入一段外源DNA同源修复，但它跟人类DNA修复系统缺乏配合，所以外源DNA能参与修复的可能性很小，位置很不明确，而且修复结果也差强人意。 6park.com
有了这些问题，用于做实验、制造细胞系和转基因小鼠的话可以做十几个群落筛选，但用于医疗还是距离太远了
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